應(yīng)用：

• 體內(nèi)樣基質(zhì)中的3D 細(xì)胞培養(yǎng)

• 3D 環(huán)境中的活細(xì)胞成像

• 為類器官和球體創(chuàng)建 3D 支架

• 使用µ-Slide Chemotaxis進(jìn)行 3D 膠原凝膠的趨化分析

• 懸浮細(xì)胞（如白細(xì)胞）的細(xì)胞遷移分析

• 用薄膠原層涂覆細(xì)胞培養(yǎng)容器以促進(jìn)細(xì)胞附著

• 2D 與 3D 環(huán)境中的細(xì)胞分化研究

• 由于自發(fā)熒光低，非常適合熒光顯微鏡

技術(shù)特點(diǎn)：

• 來(lái)自大鼠肌腱的高質(zhì)量純化蛋白

• 高度標(biāo)準(zhǔn)化的制造過(guò)程，嚴(yán)格的質(zhì)量控制

• 溫和的制造工藝，實(shí)現(xiàn)高水平的誕生

• 提供了詳細(xì)的協(xié)議以方便處理

• 冷藏包裝運(yùn)輸并在 –20°C 下儲(chǔ)存，以獲得明確的質(zhì)量和重現(xiàn)性

• 有 2 種濃度可供選擇：用于標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用的 5 mg/ml 和用于特殊應(yīng)用的 10 mg/ml 的高濃度溶液

• 市場(chǎng)上高水平的天然交聯(lián)（最高質(zhì)量等級(jí)）

• 高粘度：建議使用用于高粘度溶液的專用移液器

• 低自發(fā)熒光

規(guī)格：

注意：我們推薦 5 mg/ml 膠原蛋白溶液用于 3D 凝膠和培養(yǎng)器皿的薄涂層。由于其高濃度（和高粘度），10 mg/ml 膠原蛋白溶液更適用于特殊應(yīng)用，例如支架和生物打印。

使用膠原蛋白作為體內(nèi)樣基質(zhì)進(jìn)行 3D 細(xì)胞培養(yǎng)

膠原蛋白是結(jié)締組織的主要成分，在哺乳動(dòng)物體內(nèi)含量豐富。它廣泛用于 3D 細(xì)胞培養(yǎng)以模擬生物細(xì)胞外基質(zhì)，或作為促進(jìn)細(xì)胞附著的涂層。

許多細(xì)胞在三維環(huán)境中自然生長(zhǎng)。在體外培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞附著在平坦的 2D 表面上，其行為可能與在 3D 凝膠基質(zhì)內(nèi)時(shí)不同。在許多情況下，3D 環(huán)境更類似于體內(nèi)情況，在規(guī)劃細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)時(shí)應(yīng)考慮到這一點(diǎn)。

貼壁 HT-1080 癌細(xì)胞在 2D 表面（左）并嵌入 3D I 型膠原蛋白、大鼠尾基質(zhì)（右）的顯微鏡和示意圖。

膠原蛋白結(jié)構(gòu)

膠原蛋白是一種纖維蛋白，由三個(gè) α 鏈組成。它們結(jié)合形成繩狀三螺旋，從而為細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 提供拉伸強(qiáng)度。α 鏈包含 GXY 重復(fù)序列，其中包括甘氨酸 (G)，這是一種非常適合三螺旋的氨基酸。通常，X 和 Y 代表羥脯氨酸和脯氨酸，它們是膠原蛋白穩(wěn)定性的關(guān)鍵成分。三重螺旋以自組織方式聚集并形成原纖維。在體內(nèi)，原纖維聚合成纖維，形成肌腱或真皮等組織。

用于體外實(shí)驗(yàn)的膠原蛋白是從動(dòng)物組織中提取的酸或酶。在酸性條件下（低 pH 值），纖維分解成可溶性原纖維。在一些提取方法中，胃蛋白酶用于促進(jìn)膠原蛋白的提取。但胃蛋白酶也會(huì)在一定程度上消化膠原蛋白，導(dǎo)致天然纖維交聯(lián)活性顯著降低。

與胃蛋白酶提取的膠原蛋白（通常來(lái)自牛皮膚）不同，ibidi I 型鼠尾膠原蛋白是酸提取的。這一點(diǎn)，以及非常溫和的制造過(guò)程，保留了最大的誕生。

膠原蛋白的結(jié)構(gòu)

膠原聚合

在酸性溶液中，膠原纖維以無(wú)定向的方式存在。膠原纖維之間僅形成氫鍵，這使溶液具有高粘度。變?yōu)橹行?pH 值會(huì)導(dǎo)致原纖維聚合成纖維。這種聚合產(chǎn)生了一種三維膠原凝膠。所用膠原蛋白的原生水平?jīng)Q定了膠原蛋白網(wǎng)絡(luò)中的纖維交聯(lián)水平。天然（非胃蛋白酶提取的）膠原蛋白表現(xiàn)出高水平的交聯(lián)，而胃蛋白酶化的膠原蛋白溶液在體內(nèi)形成較少的凝膠。

ibidi 膠原蛋白 I 型，鼠尾膠原蛋白由于蛋白質(zhì)濃度高而具有非常高的粘度，尤其是在 10 毫克/毫升時(shí)。pH 驅(qū)動(dòng)聚合改變其特性如下：